引用本文
罗小娟, 曹科, 马东礼, 刘新刚, 黄宝兴, 陈运生. 健康未成年人群干化学法血清酶水平分析.循证医学, 2015,15(4): 232-235
LUO Xiao-juan, CAO Ke, MA Dong-li, LIU Xin-gang, HUANG Bao-xing, CHEN Yun-sheng. Analysis of Serum Enzymes in Healthy Children and Adolescents by Dry Chemical System. Journal of Evidence-based Medicine, 2015,15(4): 232-235  
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健康未成年人群干化学法血清酶水平分析
罗小娟, 曹科, 马东礼, 刘新刚, 黄宝兴, 陈运生
深圳市儿童医院检验科, 广东深圳 518038
通讯作者:曹科,Tel：0755-83008362; E-mail：cocoa526878@126.com

作者简介:罗小娟（1983-）,女,广东兴宁人,主管技师,医学硕士,从事临床生化检验工作。

摘要

目的 了解深圳市健康未成年人血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）活性的数据,分析以年龄、性别分组后四种血清酶的差异情况。方法 将2 351名3月龄到18周岁健康未成年人分为婴幼儿组、学龄前组、学龄组、青春组,使用干生化分析仪检测四种血清酶,分析各年龄、性别血清酶活性。结果 学龄组的AST、ALP、GGT,青春组的ALT、AST、ALP、GGT男、女组间差异均有统计学意义（ P值均<0.05）,除学龄组ALP女童高于男童外,其余均为男童高于女童,其余各组无性别差异（ P值均>0.05）。随着年龄的增长,各项目呈现不同的变化趋势,婴幼儿组与学龄组的ALP、学龄前组与学龄组的ALT差异无统计学意义（ P值均>0.05）,其余各年龄组间差异均有统计学意义（ P值均<0.05）,不同年龄组血清酶水平存在差异。结论 未成年人血清酶活性水平具有性别差异及年龄趋势性变化,应建立相适应的参考区间。

关键词: 血清酶; 干化学法; 儿童; 青少年
中图分类号:R446.11 文献标识码:A 收稿日期:2014-12-21
基金: 深圳市科技局资助项目（201203074）; 深圳市发改委重点实验室资助项目（[2012]866）
Analysis of Serum Enzymes in Healthy Children and Adolescents by Dry Chemical System
LUO Xiao-juan, CAO Ke, MA Dong-li, LIU Xin-gang, HUANG Bao-xing, CHEN Yun-sheng
Department of Clinical Laboratory, Shenzhen Children’s Hospital, Guangdong Shenzhen 518038, China
Abstract

Objective To analyze the level of alanine aminotransferase（ALT）, aspartate aminotransferase（AST）, alkaline phosphatase（ALP）, gamma glutamyltransferase（GGT） among healthy children and adolescents, and compare the differences between genders and ages.Methods A total of 2 351 healthy children and adolescents aged from 3 months to 18 years were divided into 4 groups： infant group, pre-school group, school age group and youth group. The serum enzymes in venous blood were detected by dry chemical system, and data were analyzed by statistical methods between different ages and genders.Results Except the ALP of school age group in girls was significantly higher than that in boys （ P<0.05）, the AST, GGT of school age group and the ALT, AST, ALP, GGT of youth group in boys was significantly higher than that in girls （ P<0.05）. The serum enzymes showed significant differences in different age groups. The trend of 4 enzymes increase or decline with increasing age （ P<0.05）, but ALP showed no significant difference between infant and school age group, ALT showed no significant difference between pre-school and school age group （ P>0.05）. We should set up different reference intervals according to the different age group.Conclusion The serum enzymes have gender differences and significantly associated with the change of age in healthy children and adolescents, and the laboratory shall establish a corresponding reference intervals.

Key words: enzymes; dry chemical; children; adolescent

丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase, ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase, AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）、γ -谷氨酰转肽酶（gamma glutamyltransferase, GGT）是临床常用的四种血清酶, 用于肝胆、骨骼等系统疾病的诊断、鉴别诊断及治疗监测。目前, 中国成年人血清酶项目正常水平已公布并广泛应用于临床, 解决了中国成年人血清酶项目正常值缺乏的重大问题[1]。由于儿童和青少年生长发育的特殊性, 多种检测指标随年龄增长而变化, 与成年人存在显著差异, 而现在尚未建立中国儿童青少年血清酶统一的参考区间, 因此, 有必要了解健康未成年人群上述四种血清酶的变化规律, 分析其趋势性, 为今后进一步建立合理的参考区间提供合理的数据依据。我们在先前学龄前期研究的基础上[2], 进一步扩大人群, 参照美国临床和实验室标准化协会（Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI）的C28-A3文件程序[3], 分析3月龄到18周岁健康未成年人群血清酶水平, 报道如下。

1 材料与方法
1.1 研究对象

2011年2月至2013年9月（调查时间主要集中在每年的2~3月、9~10月及2013年6~9月）在深圳市五个区级妇幼保健院（福田、罗湖、南山、宝安、龙岗）和本院儿保科健康体检的婴幼儿、学龄前儿童、中小学健康儿童和青少年。选取调查时无不适, 未发现急、慢性疾病, 体格发育评价在同年龄、同性别95%范围内, 体检结论为健康的2 351例3月龄到18周岁未成年人作为研究对象, 其中男性1 350例, 女性1 001例。根据教科书[4]的分期标准将研究对象按年龄分成四大组：3个月~3岁（婴幼儿组）、~6岁（学龄前组）、~12岁（学龄组）、~18岁（青春组）, 再按男、女性别分成8小组。

1.2 方法

1.2.1 样本采集与处理 所有儿童于清晨安静坐姿或仰卧位空腹抽取2 mL静脉血于真空采血管, 1 h内以3 000 rpm/min离心10 min, 剔除溶血、黄疸及脂血不合格标本, 4 h内在干化学分析系统完成血清酶项目的检测。

1.2.2 标本检测 所有标本在美国强生VITROS 350干化学分析系统测定, 仪器配套校准品和试剂, 四种血清酶项目均用速率法检测其活性, 其中ALT和AST反应体系中添加5-磷酸吡哆醛（pyridoxal-5-phosphate, P-5-P）。每日用伯乐BIO-RAD双水平质控血清测定, 质控结果均在控, 标本检测结果准确可靠。

1.2.3 离群值的判断标准 参照C28-A3文件方法判断离群值[3]：每组数据分别从小到大排列, 将疑似离群值和其相邻值的差值（D）和数据全距（R）相除, D/R应≤ 1/3, 若D/R> 1/3考虑为离群值。若有2个或以上疑似离群值, 将最小的疑似离群值如上作处理, 若D/R> 1/3, 则剔除所有疑似离群值所在标本的所有检测结果; 若D/R≤ 1/3, 则保留所有数据。

1.2.4 分组分析男、女性别正常水平的标准 参照C28-A3文件方法[3]：对于男、女组间比较均值差异无统计学意义的两组数据直接将数据合并; 对于男、女组间比较均值差异有统计学意义的两组数据计算和比较Z和Z∗值, Z=（x1-x2）/（S12/n1+S22/n2）1/2, Z∗=3[（n1+ n2）/240]1/2, 其中x1和x2为两组各自的均值, S1和S2为两组各自的标准差, n1和n2为两组各自的组数, 若Z大于Z∗, 则需要按性别分组分析正常水平, 否则不需要按性别分组分析。

1.3 统计学分析

用SPSS 13.0统计软件进行分析, 正态性检验采用Shapiro-Wilk法检验, 偏态分布资料采用M（Q1, Q3）表示, 两组间和多组均值比较采用非参Mann-Whitney U和Kruskal-Wallis法检验, 各项目与年龄的相关性分析采用Spearman法, 采用百分位数法2.5%~97.5%确定正常水平, 以P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结 果
2.1 离群值的判断

经判断, 男童组有4人份标本共4个检测结果、女童组有2人份标本共3个检测结果为离群值, 需剔除, 最后纳入2 345份标本进行统计学分析。

2.2 同年龄男、女童血清酶检测结果比较

经正态性检验, 各组数据均呈偏态分布, 用M（Q1, Q3）表示。同年龄男、女童组间均值比较经Mann-Whitney U检验, 学龄组的AST、ALP、GGT, 青春组的ALT、AST、ALP、GGT男、女童组间均值差异均有统计学意义（P值均< 0.05）, 除学龄组ALP女童高于男童外, 其余均为男童高于女童, 其余项目男、女童间均值差异无统计学意义（P值均> 0.05）, 见表1。

表1 同年龄男、女童血清酶检测结果比较 U/L
2.3 不同年龄组间血清酶检测结果比较

各年龄组数据经Kruskal-Wallis法检验, 各项目不同年龄组间检测结果差异有统计学意义（P值均< 0.05）, 其中婴幼儿组与学龄组的ALP检测结果、学龄前组与学龄组的ALT检测结果差异无统计学意义（P值均> 0.05）, 其余各组间差异有统计学意义（P值均< 0.05）, 见表2。

表2 不同年龄组间血清酶检测结果比较 U/L
2.4 不同年龄段测定的血清酶检测水平变化趋势

各项目经与年龄的相关性分析提示, AST、ALT和ALP检测结果分别与年龄呈负相关（AST：r = -0.358, P=0.000; ALT：r=-0.063, P=0.001; ALP：r=-0.082, P=0.000）, 而GGT检测结果与年龄呈正相关（r=0.266, P=0.000）。男、女童四种血清酶均随着年龄的增长而呈现基本一致的变化趋势, 但各项目间的变化趋势各不相同。ALT检测结果总体呈缓慢下降趋势, 而AST呈不断下降; 虽然ALP与年龄总体呈负相关, GGT与年龄总体呈正相关, 但ALP和GGT的检测结果随年龄变化而变化。ALP在6岁前呈现下降趋势, 然后上升, 女童在13岁后开始下降, 男童则在11岁后继续上升, 14岁达高峰后开始下降, 男女童均在17岁后基本稳定在学龄前期的1/2水平。GGT在3岁呈下降趋势, 3~6岁保持低水平, 6~13岁呈缓慢升高趋势, 一直至18岁, 见图1。

图1 不同年龄段测定的血清酶检测水平变化趋势

2.5 本研究结果与现有成年人正常值比较

对于均值相等的同年龄男、女童组间的结果直接合并; 对于均值不等的组别分别计算和比较Z和Z∗值, 发现除青春组ALP 和GGT 的Z值均大于Z∗值, 男、女童数据分开分析, 其余数据均可合并分析。因各组数据均不呈正态分布, 用百分位数2.5%~97.5%确定不同年龄组间正常水平。本研究结果与中国建立的成年人参考区间及厂家提供的美国成年人参考区间相比[1, 5], 差异较大, 见表3。

表3 不同年龄组间的正常水平2.5%~97.5%, U/L
3 讨 论

大多数临床医学决策都要依据实验室准确的检查结果和指标恰当的参考区间[6]。不同年龄段的儿童青少年由于在身高体重、器官成熟、免疫应答、激素调节、营养代谢等方面存在差异而影响分析物的正常浓度[7, 8], ALT、AST、GGT和ALP是重要的血清酶, 而国内仅见小样本、少量健康儿童正常值报道[9, 10, 11], 尚未见系统性分析, 为全面系统地了解各年龄段未成年人群血清酶的活性水平, 进行了此调查。

我们的调查分析发现, 在婴幼儿期和学龄前期, 男、女童四种血清酶检测结果均无差异性, 可能是由于儿童年龄阶段较小, 身体发育情况较一致有关。随着年龄的增长, 身体发育的差异逐渐拉大, 男童在身高、体重、摄食、肌肉量、活动量等方面逐渐大于女童, 表现为在学龄期, 男、女童的AST、ALP、GGT检测结果存在差异, 在青春期, 四种血清酶检测结果均存在差异, 除学龄组ALP女童高于男童外（可能与女童性发育、生长速率加快早于男童, 血清ALP升高早有关）, 其余均为男童高于女童。这与Colantonio、Chan、Jagarinec等[12, 13, 14]的研究一致。同时, 各年龄段的血清酶浓度也在随着身体发育、激素调节等差异而存在差异, 我们的研究表明, 仅有婴幼儿期与学龄期的ALP检测结果、学龄前期与学龄期的ALT检测结果差异无统计学意义, 其余各组间差异均有统计学意义。

我们的研究发现, 随着年龄的增长, 四种血清酶的变化趋势各不相同, 这与国外Jagarinec、Turan等[14, 15]的研究基本一致, 深入了解各自的变化趋势, 有助于我们精确把握异常的病理状态。因为正常值受人种、地域、饮食习惯、生活水平以及检测方法差异等诸多因素的影响[16], 我们应用干化学法的研究结果与国外的儿童正常值比较[12, 13, 14, 15], 存在不同程度差异, 而分别与中国和美国成年人的正常值比较[1, 5], 差异较明显, 临床工作中所应用的正常值可能并不适合所有地区和人群, 了解本地区健康人群的正常值范围是非常必要的[17]。

为了方便临床了解检测项目的正常水平, 常需要考虑不同性别组、不同年龄组的数据是否可以合并, 通过科学的统计推断, 未成年时期的男、女性别差异普遍较小, 仅有青春期的ALP和GGT需要按性别分析正常水平。为了体现各年龄组正常水平的差异及趋势, 我们未考虑将各年龄组数据进行合并。从血清酶检测结果变化趋势图可清楚地了解到, 在未成年人血清酶的正常水平差异方面, 年龄的差异大于性别的差异。再次说明我们应了解合理而准确的儿科正常值水平。

总之, 通过调查深圳地区未成年人群干化学法四种血清酶活性, 分析了不同性别、年龄组的差异及趋势。因在健康婴幼儿的筛选、标本采集等方面存在较大困难, 该组数据偏少, 且未细分婴儿组和幼儿组, 尚不足以建立准确的参考区间, 但为今后建立各年龄组的参考区间提供初步数据基础, 为儿科疾病的诊疗提供更好的服务。

评论

李河教授（广东省人民医院）

“健康未成年人群干化学法血清酶水平分析”一文，通过流行病学现况研究方法初步了解了深圳市健康未成年人血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）在性别、年龄特征的分布状况及其差异性，以及随年龄增长的变化趋势，初步得出未成年人血清酶活性水平具有性别差异及年龄趋势性变化。希望本研究能够为“建立各年龄组血清酶水平参考区间”提供参考或提供初步数据基础。建议可能时按照制定临床医学实验室检测指标“正常值范围”的科研设计要求，进行严格科研设计，然后按照研究设计方案收集数据、管理数据、统计分析，以便能够达到“建立各年龄组的参考区间”的要求，为“建立各年龄组血清酶水平参考区间”提供有效数据，为儿科疾病的诊疗提供更好服务。

马清光主任医师（上海市大场医院）

检验项目的参考范围直接关系到临床疾病诊断、治疗，检验科一直习惯沿用成年人或试剂盒参考范围，这是不规范的。特别未成年人血清酶学检测，受性别、年龄、激素、种族、检测方法等因素影响，应该研究确立不同年龄人群的参考范围。本刊“健康未成年人群干化学法血清酶水平分析”一文，分析深圳市健康未成年人血清ALT、AST、ALP、GGT活性的数据，发现不同年龄组酶学差异较大，提示应建立相应年龄、性别血清酶的参考区间，对指导未成年人血清酶学临床应用具有指导意义，值得医学检验同道关注并借鉴。

The authors have declared that no competing interests exist.

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