引用本文
张可, 朱卿文, 益欢欢, 僧东杰. TPX2在鼻咽癌增殖及转移中的作用及分子机制研究. 循证医学, 2022,22(3): 163-168.
ZHANG Ke, ZHU Qing-wen, YI Huan-huan, SENG Dong-jie. The Role of TPX2 in the Proliferation and Metastasis of Nasopharyngeal Carcinoma and its Molecular Mechanism. Journal of Evidence-Based Medicine,2022,22(3): 163-168.  
DOI:10.12019/j.issn.1671-5144.2022.03.006
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TPX2在鼻咽癌增殖及转移中的作用及分子机制研究
张可, 朱卿文, 益欢欢, 僧东杰
郑州大学附属儿童医院/河南省儿童医院/郑州儿童医院耳鼻咽喉头颈外科, 郑州 450018
作者简介:

张可（1984-）,男,河南永城人,主治医师,医学本科,主要研究方向为鼻咽喉头颈外科。

基金项目:2019年度河南省医学攻关计划联合共建项目（LHGJ20190954）
摘要

目的 研究微管相关蛋白（targeting protein for Xenopus kinesin-like protein 2,TPX2）在鼻咽癌增殖和转移中的作用及可能的分子机制。方法 构建TPX2siRNA质粒,同时设置空载对照,转染人鼻咽癌细胞CNE2Z,采用CCK-8检测细胞增殖情况,Transwell试验检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot法检测细胞周期相关蛋白表达情况和EMT标志物的表达变化。结果 TPX2siRNA转染能够显著抑制CNE2Z细胞中TPX2的表达,CCK-8分析发现TPX2的干扰会显著抑制CNE2Z细胞增殖,Western blot分析发现细胞周期蛋白中cyclinD1、cyclinE下调,p27上调;Transwell试验分析发现TPX2的干扰会显著抑制细胞的侵袭;Western blot分析发现TPX2干扰后,EMT通路相关指标检测分析发现上皮细胞分子标志物E-cadherin上调,间质细胞分子标志物Vimentin-N下调。结论 TPX2抑制了CNE2Z细胞的增殖、迁移、侵袭,随着TPX2在鼻咽癌中调控机制的深入研究,TPX2有望成为鼻咽癌诊断和治疗的新靶点。

关键词: 鼻咽癌; TPX2; 上皮间质转化; 表皮生长因子受体
中图分类号:R739.6 文献标识码:A 收稿日期: 2021-03-03
The Role of TPX2 in the Proliferation and Metastasis of Nasopharyngeal Carcinoma and its Molecular Mechanism
ZHANG Ke, ZHU Qing-wen, YI Huan-huan, SENG Dong-jie
Department of Otolaryngology of Head and Neck Surgery, Zhengzhou Children’s Hospital/He’nan Children’s Hospital/Affiliated Children’s Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450018, China
Abstract

Objective To investigate the role of microtubule-associated protein （targeting protein for Xenopus kinesin-like protein 2, TPX2） in the proliferation and metastasis of nasopharyngeal carcinoma and its possible molecular mechanism. Methods The TPX2siRNA plasmid was constructed, and a no-load control was set at the same time. The cells were transfected into human nasopharyngeal carcinoma cells CNE2Z. The cell proliferation was detected by CCK-8 and the cell proliferation was detected by the Transwell test. The expression of cell cycle related proteins and EMT markers were detected by Western blot. Results TPX2siRNA transfection can significantly inhibit the expression of TPX2 in CNE2Z cells. CCK-8 analysis found that the interference of TPX2 significantly inhibited the proliferation of CNE2Z cells. Western blot analysis showed that cyclinD1 and cyclinE were down-regulated and p27 was up-regulated in cyclin. Transwell test analysis found that interference of TPX2 can significantly inhibit cell invasion. Western blot analysis showed that after TPX2 interference, EMT pathway related indicators analysis showed that the epithelial cell molecular marker E-cadherin was up-regulated, and the stromal cell molecular marker Vimentin-N was down-regulated. Conclusions TPX2 has an important effect on the proliferation, migration, and invasion of CNE2Z cells. With the further study of the regulation mechanism of TPX2 in nasopharyngeal carcinoma, TPX2 was expected to become a new target for diagnosis and treatment of nasopharyngeal carcinoma.

Key words: nasopharyngeal carcinoma; TPX2; epithelial-mesenchymal transition; epidermal growth factor receptor

鼻咽癌是发生在鼻咽粘膜上皮一种常见的上皮恶性肿瘤, 在东南亚国家以及我国南方沿海地区高发, 其发病主要与遗传和环境等多种因素有关[1]。目前鼻咽癌的临床治疗方法较多, 但是患者的长期生存率和生活质量未得到明显改善[2]。鼻咽癌患者出现预后不良的主要原因是出现局部的复发和全身转移。放疗和化疗虽然能够有效抑制鼻咽癌的发展, 但是具有明显的副作用, 降低患者的生活质量[3]。深入研究鼻咽癌细胞增殖和迁移的分子机制对有效控制疾病的发生和发展, 改善预后具有重要的作用。

微管相关蛋白（targeting protein for Xenopus kinesin-like protein 2, TPX2）是Xklp2的靶蛋白, 是一种微管相关蛋白[4]。Yan L[5]在爪蟾卵提取物实验的基础上首次提出了TPX2在纺锤体装配中的作用, 其表达和分布受细胞周期的严格调控, 与体内多种有丝分裂因子相互作用, 在细胞有丝分裂纺锤体形成过程中发挥重要功能。研究表明[6], 人类多种肿瘤中都存在TPX2的过表达, 其过量表达影响纺锤体的正常形成与分离, 导致异倍体的形成, 并有实验表明其与肿瘤的侵袭性和预后相关。目前, TPX2已作为一种新的候选癌基因被广泛关注, 对其进行深入的研究, 不仅有助于肿瘤的早期诊断、预后判断, 更能提供新的肿瘤治疗途径, 促进个体化治疗方案的选择, 为人类抗肿瘤治疗提供新的思路与方法。但是TPX2对鼻咽癌细胞增殖和转移的研究较少, 生物学功能和可能的机制尚不清晰。本研究意在探讨TPX2在鼻咽癌增殖及转移中的作用和分子机制, 为鼻咽癌患者的治疗提供新的靶点。

1 材料和方法
1.1 试剂

鼻咽癌细胞系CNE2Z购自美国ATCC公司, 由郑州大学附属儿童医院实验室保存; 胎牛血清; RPMI1640和DMEM培养基（Gibco公司）; 二甲基亚砜（DMSO）（美国Sigma公司）; CCK8、碘化丙啶、多聚甲醛（碧云天生物技术公司）; ECL发光液（Thermo Fisher Scientific公司）; Annexin VIFITC/PI细胞凋亡检测试剂盒（博谷生物科技有限公司）; matrigel（美国Conrning公司）; 反转录试剂盒（TaKaRa公司）; SYBR、supermix（诺唯赞公司）; Western Blot试剂（上海生工生物工程公司）; 蛋白marker（NEB公司）; Transwell小皿（Corning公司）; TPX2抗体、β -actin、P21抗体（Abcam公司）、TPX2siRNA（吉码制药有限公司）, 经本课题前期实验证明后, 选取1条最为有效靶点序列, 正义链：5′ -GCGAGAAUCAAAGAAGAAATT-3′ , 反义链：5′ -UUUCUUCUUUGAUUCUCGCTT-3′ [7]; 其他试剂为国产分析纯。

1.2 细胞培养和转染

CNE2Z细胞常规培养于10%胎牛血清的RPMI-1640的培养基中, 37℃、5% CO2培养, 每隔2~3天观察细胞生长状况, 待细胞融合度达到80%以上时, 用0.25%胰蛋白酶消化, 传代。

1.3 CCK8细胞增殖检测及克隆形成实验

设立TPX2siRNA转染组和空白转染组, 细胞株选择方面, 在多个鼻咽癌细胞及永生化上皮细胞株中检测TPX2表达, 筛选TPX2高表达的细胞系进行干扰实验, 细胞消化铺96孔板, 每孔细胞数量为5×103个, 体积100 μ L, 每组设定5个复孔, 于37℃、5% CO2培养箱培养24 h, 弃去培养基, 每孔加入10 μ L CCK-8和90 μ L 1640完全培养基, 另取3个没有接种细胞的孔加入等量的培养基和CCK-8作为空白对照, 培养箱中2 h, 测定OD值, 检测完毕后将各孔培养基更换为1640完全培养基, 并于48 h、72 h重复上述操作。

克隆形成实验将对照组、TPX2siRNA转染组的CCK8细胞接种于6孔板中, 每孔200个细胞, 接种7 d后, 废弃培养基, 每个孔用PBS仔细洗2次。使用4%多聚甲醛固定, 然后用Giemsa染色液染色。

1.4 实时定量PCR检测

Trizol法提取总RNA, 利用Takara反转录试剂盒将1 μ g总RNA反转为cDNA, 反转录体系为：总RNA 1.0 μ L, Random primer 0.5 μ L, RNase Inhibitor 0.25 μ L, dNTP mix 1 μ L, RNase free dH2O 3.75 μ L, 10×RT buffer 1 μ L。反应条件为30℃ 10 min, 42℃ 30 min, 95℃ 5 min, 5℃ 5 min, 终止反应, 反应所得cNDA暂存于-20℃备用。根据NCBI登录的人源TPX2基因序列设计并合成qPCR引物, 上游引物5′ -GTGGAAATATGCCCTTTCTTT-3′ , 下游引物5′ -AGAAAGGGCATATTTCCACTT-3′ ; 以GAPDH作为内参进行, 上游引物5′ -CAGCGACACCCA CTCCTC-3′ , 下游引物5′ -TGAGGTCCACCACC CTGT-3′ 。反转录体系为：总RNA 1.0 μ L, Random primer 0.5 μ L, RNase Inhibitor 0.25 μ L, dNTP mix 1 μ L, RNase free dH2O 3.75 μ L, 10×RT buffer 1 μ L。反应条件为30℃ 10 min, 42℃ 30 min, 95℃ 5 min, 5℃ 5 min, 终止反应, 反应所得cNDA暂存于-20℃备用。将所得cDNA进行50倍比稀释, 取5 μ L作为模板, 同时加入2 × SYBR SuperMix 10 μ L, 上下游引物分别为0.5 μ L, ddH2O 4 mL。

1.5 Western blot检测

不同处理的CNE2Z细胞用PBS清洗3次, 加入蛋白酶/磷酸酶抑制剂和RIPA抑制剂, 冰上裂解15 min。将裂解的蛋白液收集到1.5 mL的管中, 4℃ 12 000 r/min离心10 min, 吸取上清至另一个EP管中。Bradford法检测蛋白浓度, 取部分蛋白液加入上样缓冲液, 100℃煮沸10 min。取处理好的蛋白样品各30 μ g, 进行SDS-PAGE凝胶电泳, 转膜, 封闭, 一抗4℃处理过夜, PBST清洗, 加入二抗, 室温孵育1 h, PBST清洗后加入ECL发光液（Emitter Coupled Logic）, 利用凝胶成像仪对信号进行采集, 利用ImageJ比较蛋白表达水平。

1.6 细胞迁移侵袭试验

将Transwell小室在37℃进行温育, RPMI-1640培养基重悬消化的细胞, 调整细胞浓度为2×105/mL; 小室内下层加入含血清的完全培养基, 上室加入100~150 μ L的细胞悬液, 培养箱中作用24 h, 取出Transwell皿, 吸取培养基, 甲醇固定30 min; Giemsa染色液室温处理15~30 min, 用湿润的棉棒蘸取上室底部膜表面的细胞, 然后反转底面朝上晾干, 显微镜下观察计数。

1.7 数据分析

采用SPSS 20.0软件对数据进行统计分析, 以P< 0.05表示有显著性差异。

2 结果
2.1 TPX2siRNA干扰效果分析

实时定量PCR检测TPX2siRNA干扰组、空载对照组。结果分析发现TPX2siRNA组TPX2 mRNA相比于对照组显著降低, 其mRNA沉默效率大约为75%（表1）。我们进一步采用Western blot方法检测了TPX2siRNA作用的细胞中TPX2的蛋白表达水平, 结果显示TPX2siRNA组比空白对照组蛋白表达水平显著降低, 表明靶向siRNA对细胞中的TPX2的表现具有显著的抑制作用, 抑制率大约为75%（图1）。

表1 TPXsiRNA转染抑制CNE2Z细胞中TPX2的mRNA水平 Tab.1 Inhibition of TPX2 mRNA level in CNE2Z cells by TPX siRNA transfection

图1 TPX2siRNA对TPX2表达影响
注：A. 实时定量PCR; B. Western blot; ∗∗∗表示与对照组相比, P< 0.001Fig.1 The effect of TPX2siRNA on TPX2 expression
Note：A. RT-qPCR; B. Western blot; ∗∗∗Compare with the control group, P< 0.001

2.2 敲减TPX2影响CNE2Z细胞增殖

为了探讨TPX2siRNA转染对细胞增殖的影响, 本研究采用CCK-8克隆形成实验分析TPX2siRNA组和对照组细胞增殖情况, 分析发现随着细胞增殖分裂, TPX2siRNA组相比对照组细胞生长速度明显降低, TPX2siRNA转染显著抑制了细胞的增殖活性, 在72 h达到显著, P< 0.05（图2）。

图2 TPXsiRNA抑制细胞增殖
注：Giemsa染色× 100; 表示与对照组相比, P< 0.001Fig.2 TPXsiRNA inhibits cell proliferation
Note： Giemsa staining × 100; Compare with the control group, P< 0.001

2.3 TPX2干扰对细胞周期蛋白的影响

为了分析TPX2敲减对细胞周期相关蛋白的影响, 本研究利用Western blot检测了细胞周期蛋白cyclinD1、cyclinE、p27的表达情况（图3）, 结果显示在TPX2干扰后, 细胞周期相关蛋白中cyclinD1、cyclinE下调, p27上调, 以上结果说明干扰TPX2表达对细胞周期具有抑制作用。

图3 TPX2si干扰对细胞周期蛋白的影响
注：A. Western blot检测; B. 蛋白表达量化分析, ∗∗表示与对照组相比, P< 0.01Fig.3 The effect of TPX2si interference on cyclin
Note：A. Western blot analysis; B. quantitative analysis of protein expression, ∗∗ compared with the control group, P< 0.01

2.4 TPX2敲减影响细胞的迁移

本研究采用Transwell试验分析细胞迁移能力, 将完成迁移的各组随机选取5个视野（200× ）, 取平均值, 计算Transwell下室每个视野内细胞中数目。结果显示TPXsiRNA组细胞穿膜数显著小于对照组（图4）, 以上结果说明TPX2敲减抑制细胞的迁移。

图4 Transwell细胞侵袭试验
注：A. 穿膜细胞成像（200× ）; B. 细胞数目统计分析, ∗∗表示与对照组相比, P< 0.01Fig.4 Transwell cell invasion test
Note： A. transmembrane cell imaging （200× ）; B. statistical analysis of cell number; ∗∗ Compared with the control group, P< 0.01

2.5 TPX2干扰对EMT标志物的影响

Western blot检测分析发现, CNE2Z细胞中转染TPX2siRNA后细胞迁移率标记蛋白（matrix metalloproteinase-2, MMP-2）和（matrix metalloproteinase-9, MMP-9）水平降低, 上皮细胞-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）通路相关指标检测分析发现上皮细胞分子标志物E-cadherin上调, 间质细胞分子标志物形蛋白（Vimentin-N）下调（图5）, 以上结果说明TPX2siRNA可能通过影响EMT通路进而抑制细胞迁移。

图5 Western blot检测TPX2干扰对EMT相关标志物的影响Fig.5 The effect of TPX2 interference on EMT related markers detected by Western blot

3 讨论

TPX2作为新的候选癌基因, 受到越来越多的关注。许多实验表明人类肿瘤中存在TPX2的过表达, 过量的TPX2阻断了双极纺锤体的形成, 使纺锤体极结构异常增大, 导致异倍体的形成, 从而导致细胞生物学行为的异常[7, 8]。RNA干扰是一种转录后的基因沉默机制, siRNA的反义链和mRNA的同源区碱基互补配对, 核酸内切酶切割靶分子中与反义链互补区域, 特异性阻断基因表达[9, 10]。TPX2会对肿瘤细胞周期产生重要影响。研究发现[11]TPX2过表达与患者的存活率或肿瘤侵袭性存在相关性, 并且抑制TPX2的过表达可以有效减少组织培养中癌细胞的生长, 诱导凋亡, 抑制其在软琼脂和裸鼠中的生长, 并能够增加癌细胞对紫杉醇的敏感性。TPX2通过调控细胞周期蛋白cyclinD1、cyclinE、CDK4、p21、p27来调控肿瘤的恶性生物学行为[11]。本实验发现在TPX2干扰后进行Western blot检测分析, cyclinD1、cyclinE表达下调, P27表达上调, 该结果和Iyoda的研究较为接近。另外, TPX2会对肿瘤细胞的增殖产生影响, TPX2敲低促进细胞凋亡并增加细胞在G2/M期的比例; 此外, 它还抑制胆管癌的入侵和迁移[12, 13, 14]。

TPX2对肿瘤细胞的迁移、侵袭产生重要影响。当用TPX2siRNA干扰细胞TPX2蛋白表达时, 促进细胞的凋亡; 将细胞周期阻滞于G2/M期而不能进行正常的有丝分裂; 抑制细胞的迁移和侵袭能力[15, 16, 17]。研究的结果提示了这些患者中TPX2表达的预后价值。在有丝分裂期间, TPX2能够与下游伴侣（包括AuroraA激酶）相互作用, 导致AuroraA定位于有丝分裂纺锤体的微管。此外, TPX2通过将其锁定在活性构象中来激活AuroraA的激酶活性[18, 19]。本实验通过RNA干扰技术下调TPX2表达, 发现CNE2Z细胞的迁移以及侵袭能力显著下降。干扰TPX2的表达会使上皮表型标志物E-cadherin上调, 而间质表型标志物Vimentin显著降低, 结果提示EMT过程可能受到抑制。EMT在鼻咽癌的发生、发展以及转移中产生了重要作用, TPX2对EMT过程具有重要的调控作用, 提示其可以作为癌症治疗的干预靶点[20]。

总的来说, TPX2能够诱导EMT的发生调控鼻咽癌细胞的迁移和侵袭, TPX2的表达降低并且伴随EMT标志物的改变。TPX2可能通过cyclinD1、cyclinE、CDK4、p21、p27来调控CNE2Z细胞的增殖、迁移、侵袭。随着TPX2在鼻咽癌中调控机制的深入研究, TPX2有望成为鼻咽癌诊断和治疗的新靶点。

参考文献
[1] LU H J, LIU J, DING X. Research progress on comprehensive treatment of nasopharyngeal carcinoma[J]. Journal of Otolaryngology and Ophthalmology, Shand ong University, 2019, 33(2): 26-30.
[陆海军, 刘霁, 丁晓. 鼻咽癌的综合治疗研究进展[J]. 山东大学耳鼻喉眼学报, 2019, 33(2): 26-30. ] [本文引用:1]
[2] LIN C F, LI D S, LIN B H, et al. Retrospective study on local recurrence of nasopharyngeal carcinoma after treatment[J]. Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment, 2017, 24(3): 188-191.
[林灿峰, 李东升, 林柏翰, 等. 鼻咽癌治疗后局部复发回顾性研究[J]. 中华肿瘤防治杂志, 2017, 24(3): 188-191. ] [本文引用:1]
[3] WU L, LI C, PAN L. Nasopharyngeal carcinoma: a review of current updates[J]. Exp Ther Med, 2018, 15(4): 3687-3692. [本文引用:1]
[4] SUI C, SONG Z, YU H, et al. Prognostic significance of TPX2 and NIBP in esophageal cancer[J]. Oncol Lett, 2019, 18(4): 4221-4229. [本文引用:1]
[5] YAN L, LI Q, YANG J, et al. TPX2-p53-GLIPR1 regulatory circuitry in cell proliferation, invasion, and tumor growth of bladder cancer[J]. J Cell Biochem, 2018, 119(2): 1791-1803. [本文引用:1]
[6] GONG D, CHEN X, YANG T, et al. Upregulation of ECT2 is associated with transcriptional program of cancer stem cells and predicts poor clinical outcome in gastric cancer[J]. Oncol Lett, 2020, 20(4): 54. [本文引用:1]
[7] SHANG R F, WU L G. Mechanism and application of RNA interference[J]. Life Sciences, 2016, 28(5): 576-583.
[尚仁福, 吴立刚. RNA干扰的机制及其应用[J]. 生命科学, 2016, 28(5): 576-583. ] [本文引用:2]
[8] HUANG D H, JIAN J, LI S, et al. TPX2 silencing exerts anti-tumor effects on hepatocellular carcinoma by regulating the PI3K/AKT signaling pathway[J]. Int J Mol Med, 2019, 44(6): 2113-2122. [本文引用:1]
[9] ZHENG B B. Effect of TPX2 expression level on biological characteristics of cholangiocarcinoma cells[D]. Nanchang University, 2018.
[郑兵兵. TPX2表达水平对胆管癌细胞生物学特性的影响[D]. 南昌大学, 2018. ] [本文引用:1]
[10] CHEN J, XIA H, ZHANG X, et al. TPX2 regulates the Rho/ERK signalling axis to promote early recurrence in human hepatocellular carcinoma[J]. J hepatol, 2015, 62(6): 1287-1295. [本文引用:1]
[11] WANG Z Q, ZHANG Y, CUI J, et al. Effect of TPX2 on proliferation and apoptosis of laryngeal cancer cells through TLR4 signaling pathway[J]. Journal of Shanxi Medical University, 2020, 51(9): 912-917.
[王志平, 张义, 崔静, 等. TPX2通过TLR4信号通路对喉癌细胞增殖与凋亡的影响[J]. 山西医科大学学报, 2020, 51(9): 912-917. ] [本文引用:2]
[12] ZHOU X Q, WANG M, WANG L Q, et al. Experimental study on inhibiting the growth of laryngeal cancer cells by down regulating TPX2 in vitro[J]. Modern Oncology, 2019, 27(8): 1314-1319.
[周雪琴, 王敏, 王刘倩, 等. 下调TPX2抑制喉癌细胞生长的体外实验研究[J]. 现代肿瘤医学, 2019, 27(8): 1314-1319. ] [本文引用:1]
[13] MAO L W, TAN J, WANG F, et al. Retrospective study comparing anti-EGFR monoclonal antibody plus cisplatin-based chemoradiotherapy versus chemoradiotherapy alone for stage Ⅱ-Ⅳb nasopharyngeal carcinoma and prognostic value of EGFR and VEGF expression[J]. Clin Otolaryngol, 2019, 44(4): 572-580. [本文引用:1]
[14] LI Y, LI R. Expression level and correlation analysis of nedaplatin and nasopharyngeal carcinoma related proteins p53, Bcl-2, caspase[J]. Hebei Medical, 2017, 39(9): 1285-1288.
[李燕, 李嵘. 奈达铂与鼻咽癌相关蛋白P53、Bcl-2、caspase的表达水平与相关性分析[J]. 河北医药, 2017, 39(9): 1285-1288. ] [本文引用:1]
[15] HU C, ZHOU W G, LIANG C Y, et al. CD44 and CD24 regulate the molecular mechanism of phosphorylation of STAT3 in nasopharyngeal carcinoma cell line HK-1[J]. Labeling Immunoassay and Clinic, 2017, 24(4): 438-442.
[胡琛, 周维国, 梁晨阳, 等. CD44和CD24在鼻咽癌细胞系HK-1中调控STAT3发生磷酸化的分子机制研究[J]. 标记免疫分析与临床, 2017, 24(4): 438-442. ] [本文引用:1]
[16] LIN Q H, WANG H G, LIN X Q, et al. PTPN12 affects nasopharyngeal carcinoma cell proliferation and migration through regulating EGFR[J]. Cancer Biother Radiopharm, 2018, 33(2): 60-64. [本文引用:1]
[17] JIANG Z, HUANG H X, CHEN D G, et al. Risk factors of vertebral artery stenosis after intensity modulated radiation therapy for nasopharyngeal carcinoma[J]. Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment, 2020, 12(3): 347-351.
[江舟, 黄海欣, 陈达桂, 等. 鼻咽癌调强放射治疗后发生椎动脉狭窄的危险因素[J]. 中国癌症防治杂志, 2020, 12(3): 347-351. ] [本文引用:1]
[18] YAN C, XIAO H, ZHAO Z Z, et al. Polymorphism of rs1058992 gene encoding microtubule related protein 9 and EBV related tumor susceptibility[J]. Journal of Qingdao University (Medical Edition), 2019, 55(1): 68-71, 75.
[闫春, 肖华, 赵真真, 等. 微管相关蛋白9编码基因rs1058992位点多态性与EBV相关肿瘤易感性[J]. 青岛大学学报(医学版), 2019, 55(1): 68-71, 75. ] [本文引用:1]
[19] LEI X, FAN C W, TIAN J, et al. Effect of stathmin gene silencing on proliferation and apoptosis of nasopharyngeal carcinoma cell line 5-8F[J]. Chinese Journal of Pathophysiology, 2012, 28(7): 1335-1337.
[雷迅, 范才文, 田晶, 等. 微管不稳定蛋白stathmin基因沉默影响鼻咽癌5-8F细胞系增殖与凋亡[J]. 中国病理生理杂志, 2012, 28(7): 1335-1337. ] [本文引用:1]
[20] WANG M, ZHAO H, ZHENG J F, et al. Effect and mechanism of resveratrol on autophagy of nasopharyngeal carcinoma CNE-2 cells[J]. Tianjin Medical, 2017, 45(2): 143-145.
[王敏, 赵红, 郑家法, 等. 白黎芦醇对鼻咽癌CNE-2细胞自噬的影响及机制[J]. 天津医药, 2017, 45(2): 143-145. ] [本文引用:1]